Filmfans kennen ihn als Hauptdarsteller aus Peter Greenaways Der Koch, der Dieb, seine Frau und ihr Liebhaber. Seitdem spielte er in Dunkle Tage in St. Petersburg, Tanz in die Freiheit; auch: Ein Sommer und eine Nacht, Plunkett & Macleane - Gegen Tod und Teufe, The Last September, Tim Burtons Sleepy Hollow - Köpfe werden rollen, The Insider, Verbrechen Verführt, Die Liebe der Charlotte Gray, Robert Altmans Gosford Park, John Frankenheimers Path to War, Conor McPhersons The Actors, Mike Nichols? Engel in Amerika und Kevin Costners Open Range - Weites Land.

Zuletzt sah man ihn in Harry Potter und der Gefangene von Azkaban und Harry Potter und der Feuerkelch, wo er neben Maggie Smith, Alan Rickman, Gary Oldman und Ralph Fiennes als Albus Dumbledore auftritt, in István Szabós Being Julia, Kerry Conrans Sky Captain and the World of Tomorrow und an der Seite von Bill Murray in Wes Andersons Komödie Die Tiefseetaucher.

Seine wohl schönste Rolle verkörperte Gambon in Dennis Potters TV-Serie Der singende Detektiv. Dafür wurde er als "Bester Darsteller" von der British Film Academy (BAFTA), der Broadcasting Press Guild (Gewerkschaft der Rundfunkkritiker) und der Royal Television Society ausgezeichnet. Weitere Fernsehrollen übernahm er auf BBC in Wives and Daughters, in Charles Sturridges gefeiertem Längengrad und zuletzt in Stephen Poliakoffs A Family Tree.

Aktuell war Gambon auf der Bühne neben Lee Evans in Matthew Warchus? Inszenierung Endspiel zu sehen. Zu seinen zahlreichen Theaterauftritten gehören die Titelrollen in Macbeth, Coriolanus und Othello, Simon Grays Otherwise Engaged, Alan Ayckbourns Normans Eroberungen, Ganz unter uns und Der Held des Tages, neben Ralph Richardson in Alice?s Boys, Harold Pinters Alte Zeiten, die Titelrolle in Onkel Wanja und Veteran?s Day mit Jack Lemmon.

Im Ensemble der Royal Shakespeare Company übernahm er die Hauptrollen in Harold Pinters Betrogen und Mountain Language, Simon Grays Ende des Spiels, Christopher Hamptons Geschichten aus Hollywood, Ayckbourns Je nachdem, wer mit wem und Familiengeschäfte sowie David Hares Skylight. Weitere Hauptrollen: König Richard III., Othello, Geld wie Heu, Blick von der Brücke und Yasmina Rezas Der Mann des Zufalls. Aktuell trat er in Nicholas Hytners Cressida-Inszenierung am Almeida Theatre, Patrick Marbers Inszenierung Der Hausmeister im West End und in Stephen Daldrys Die Kopien am Royal Court auf.